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血紅蛋白測(cè)定法主要有氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法、疊氮高鐵血紅蛋白測(cè)定法、堿羥血紅蛋白測(cè)定法、酸化血紅蛋白測(cè)定法和十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測(cè)定法等。 1.氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法：在一定量的血液中加入試劑，使血紅蛋白轉(zhuǎn)化為氰化高鐵血紅蛋白，然后用分光光度計(jì)在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算血紅蛋白濃度。 2.疊氮高鐵血紅蛋白測(cè)定法：原理與氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法相似，但使用的試劑不同。 3.堿羥血紅蛋白測(cè)定法：通過堿液使血紅蛋白轉(zhuǎn)化為堿羥血紅蛋白，進(jìn)行吸光度測(cè)定。 4.酸化血紅蛋白測(cè)定法：利用酸性溶液處理血液，再測(cè)定吸光度。 5.十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測(cè)定法：使用十二烷基硫酸鈉使血紅蛋白變性，然后測(cè)定。 不同的血紅蛋白測(cè)定法各有特點(diǎn)，在實(shí)際應(yīng)用中，需根據(jù)具體情況選擇合適的方法，并嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行，以確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

(1)升高：溶血性貧血(60～650mg/L)、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(200～2500mg/L)、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥、陣發(fā)性行軍性血紅蛋白尿癥、黑尿熱、冷凝集素病、燒傷、溶血性輸血反應(yīng)(>150mg/L)、體外循環(huán)手術(shù)后、溫性抗體型自身免疫性溶血性貧血、鐮狀細(xì)胞性貧血、地中海貧血等?！　?2)遺傳性球形紅細(xì)胞性貧血的游離血紅蛋白濃度正常。

1、氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN）：1966年被ICSH推薦為參考方法。該法操作簡(jiǎn)單、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定可靠、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點(diǎn)。其致命的弱點(diǎn)是氰化鉀（KCN）試劑有劇毒，使用管理不當(dāng)可造成公害。2、十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測(cè)定法（SDS）：該法操作簡(jiǎn)單、呈色穩(wěn)定、準(zhǔn)確性和精確性符合要求、無(wú)公害等優(yōu)點(diǎn)。但由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認(rèn)，不能直接用吸光度計(jì)算Hb濃度，而且SDS試劑本身質(zhì)量差異較大會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。3、疊氮高鐵血紅蛋白（HiN3）法：該法優(yōu)點(diǎn)與HiCN測(cè)定法相似、最大吸收峰在542nm、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定、試劑毒性僅為HiCN測(cè)定法的1/7，但仍存在公害問題。4、堿羥血紅蛋白（AHD575）測(cè)定法：該法試劑簡(jiǎn)單、呈色穩(wěn)定、無(wú)公害、吸收峰在575nm、可用氯化血紅素作為標(biāo)準(zhǔn)品。但儀器多采用540nm左右濾光板，限制了此法使用。5、溴代十六烷基三甲胺（CTAB）血紅蛋白測(cè)定法：該法試劑溶血性強(qiáng)又不破壞白細(xì)胞，適用于儀器上自動(dòng)檢測(cè)Hb和白細(xì)胞。缺點(diǎn)是測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度不佳。

　類過氧化物酶反應(yīng)法：<40mg/L(<4mg/dl)。血漿游離血紅蛋白增高可表明存在血管內(nèi)溶血,如陣發(fā)性寒冷性瓜紅蛋白尿,冷凝集素綜合征,行軍性血紅蛋白尿,微血管病性溶血性貧血,溶血性輸血反應(yīng),體外循環(huán)等.地中海性貧血時(shí)也可升高.