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嘌呤霉素是一種常用的抗生素，在分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)實驗中，常被用于篩選轉(zhuǎn)染了特定基因的細胞。其篩選濃度的確定至關(guān)重要，合適的濃度能有效篩選出陽性克隆，濃度不當則可能導(dǎo)致篩選失敗。 嘌呤霉素的篩選濃度會受到多種因素的影響。首先是細胞類型，不同的細胞對嘌呤霉素的敏感性差異較大。例如，一些腫瘤細胞系可能相對耐受嘌呤霉素，需要較高的濃度才能達到篩選效果；而正常細胞系可能對其更為敏感，較低濃度就可發(fā)揮作用。 一般來說，在進行篩選之前，需要進行預(yù)實驗來確定最佳的篩選濃度。預(yù)實驗時，將細胞接種于多個培養(yǎng)孔中，分別加入不同濃度梯度的嘌呤霉素，如0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml等，培養(yǎng)一段時間后觀察細胞的生長和死亡情況。通常以在一定時間內(nèi)（如7 - 10天）能使未轉(zhuǎn)染細胞全部死亡，而轉(zhuǎn)染細胞能存活的最低濃度作為篩選濃度。 在常見的細胞系中，哺乳動物細胞的嘌呤霉素篩選濃度一般在1 - 10μg/ml之間。但這只是一個大致范圍，具體還需根據(jù)實際情況進行調(diào)整。確定合適的篩選濃度后，在后續(xù)的篩選過程中要嚴格按照該濃度添加嘌呤霉素，以保證篩選結(jié)果的準確性和可靠性。