真菌培養(yǎng)的方法與直接鏡檢法相比較而言，更能對(duì)大部分真菌感染的灰指甲作出準(zhǔn)確的鑒定，也是診斷灰指甲的一個(gè)很重要的手段。下面我們就從培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)時(shí)間、菌種鑒定三方面來(lái)了解一下灰指甲的真菌培養(yǎng)法。

1、培養(yǎng)基的選擇

通常培養(yǎng)真菌會(huì)同時(shí)選用兩種培養(yǎng)基，如果單用一種培養(yǎng)基，則容易忽略其它種類的真菌診斷。常見(jiàn)的兩種培養(yǎng)基，一種為沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中加抗菌劑，常為氯霉素和放線菌酮；另一種是沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中僅加氯霉素，不加放線菌酮。

2、培養(yǎng)時(shí)間

各種真菌的生長(zhǎng)速度不同，所以報(bào)告的時(shí)間也不同。一般皮膚癬菌生長(zhǎng)較緩慢，在26℃-28℃的環(huán)境下需要培養(yǎng)2-4周才能發(fā)報(bào)告，但是，皮膚癬菌含蓋的菌種較多也需要區(qū)別對(duì)待；酵母菌生長(zhǎng)較快，通常2-3就可以發(fā)報(bào)告，如果為陰性則需要觀察1周；霉菌生長(zhǎng)也比較快，一般2-4天就可以發(fā)報(bào)告。

3、菌種鑒定

（1）絲狀真菌：包括皮膚癬菌和霉菌，根據(jù)菌落形成所需要的時(shí)間，在不同條件下生長(zhǎng)的情況，菌落表面及背面的形態(tài)、色素，培養(yǎng)基中有無(wú)色素，培養(yǎng)物用乳酚棉藍(lán)染色后鏡檢找特征性標(biāo)志結(jié)構(gòu)。（2）酵母菌：分為形態(tài)學(xué)鑒定及生化試驗(yàn)。形態(tài)學(xué)鑒定主要觀察有無(wú)假菌絲產(chǎn)生，如有則為念珠菌屬，如無(wú)則為念珠菌以外的酵母菌；生化試驗(yàn)最為常用的是API系統(tǒng)，用此法鑒定準(zhǔn)確，但價(jià)格較貴。