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回答1
我們邀請(qǐng)臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師解答上述提問(wèn),您可以進(jìn)行追問(wèn)或是評(píng)價(jià)
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李春麗 主治醫(yī)師
煙臺(tái)市煙臺(tái)山醫(yī)院
三級(jí)甲等
消化內(nèi)科
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非甲-庚型肝炎的診斷:目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者大多根據(jù)TTV的ORF保守區(qū)設(shè)計(jì)引物采用巢式或半巢式聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)TTV。研究發(fā)現(xiàn).引物的設(shè)計(jì)是影響TTV基因型檢測(cè)的重要因素,采用兩套引物對(duì)TTV基因進(jìn)行了分析.同時(shí)采用Southern雜交技術(shù)進(jìn)行了輔助檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)引物和引物2單獨(dú)使用和同時(shí)使用檢測(cè)的基因型均不一樣,單獨(dú)使用時(shí)會(huì)降低基因型的分辯率。為正確分析人群中TTV的感染率。在保守區(qū)設(shè)計(jì)一條可檢測(cè)到多種基因型的多態(tài)性引物是非常必要的,也可以在病毒基因組中3個(gè)獨(dú)立的區(qū)域設(shè)計(jì)丁3對(duì)套式引物.且處于病毒基因的非編碼區(qū)。檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)比原先報(bào)道的方法要靈敏得多,大大地提高了TTV的檢出率。利用PCR方法檢測(cè)TTV DNA應(yīng)注意以下幾個(gè)問(wèn)題:①引物設(shè)計(jì):要選擇相對(duì)保守、變異較少的區(qū)段,為提高檢出率,最好能設(shè)計(jì)不同區(qū)段的引物進(jìn)行擴(kuò)增,互為補(bǔ)充。②TTV在血清中的滴度遠(yuǎn)低于HBV和HCV,為提高檢測(cè)敏感性必須優(yōu)化核酸提取的辦法并采用二次PCR。用ELISA法檢測(cè)TTV抗體已在研究中,但是敏感度較低,與TTV DNA結(jié)果相差較大。目前TTV的診斷仍主要依據(jù)PCB。
2015-07-21 23:50
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