應根據病史及潰瘍的特點，必要時作分泌物涂片、培養(yǎng)、梅毒血清學實驗等以明確診斷。

對生殖器皰疹行脫落細胞學檢查、酶聯免疫測定法。

外陰潰瘍的檢查及鑒別診斷

對軟下疳分泌物涂片檢查、分泌物培養(yǎng)、伊東-雷斯特納（Ito-Reenstieno）反應等可查到病原體。

性病性淋巴肉芽腫的輔助檢查：血清補體結合試驗，稀釋16～64倍為陽性；涂片找細胞內包涵體；雞胚和細胞培養(yǎng)分離衣原體等。

梅毒病原體檢查，即暗視野檢查。在一期梅毒的硬下疳可取少許血清滲出液或淋巴穿刺液放于玻片上，滴加生理鹽水后置暗視野顯微鏡下觀察，依據螺旋體強折光性和運動方式進行判斷，可以確診。

感染性疾病進行基因診斷：用聚合酶鏈反應（PCR）診斷生殖器感染具有快速、準確和靈敏度高的特點。

軟下疳作組織病理檢查：軟下疳有時同時感染梅毒、性病性淋巴肉芽腫、腹股溝肉芽腫、陰道皰疹等，可檢出相應致病微生物。

梅毒血清學檢查：此類檢查主要是檢測患者有無抗心質抗體（反應素）存在。密螺旋體抗原血清試驗，測定血清特異性抗體。