【摘要】 　　目的：介紹一種沙眼衣原體的快速檢測(cè)方法。

　　方法：采用衣原體單克隆抗體膠體金法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷及鑒別診斷沙眼及其它結(jié)角膜病。

　　結(jié)果：陰性結(jié)果，僅檢測(cè)板的質(zhì)控區(qū)(C)有1條紅線，檢測(cè)區(qū)(T)無(wú)紅線出現(xiàn);陽(yáng)性結(jié)果，除質(zhì)控區(qū)(C)外，另有1條紅線出現(xiàn)在檢測(cè)區(qū)(T)。10例臨床診斷沙眼的患者，其檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率為100%。10例其他原因引起的慢性結(jié)膜炎患者，其中1例查到沙眼衣原體。10例慢性病毒性結(jié)膜炎患者中1例查到沙眼衣原體。

　　結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便快速，僅0.5h可出結(jié)果，結(jié)果判斷直觀，不需要熒光顯微鏡、酶聯(lián)檢測(cè)儀等設(shè)備。具有廣闊的推廣應(yīng)用前景。

　　關(guān)鍵詞：沙眼;沙眼衣原體;衣原體單克隆抗體膠體金法;慢性結(jié)膜炎

　　【關(guān)鍵詞】 沙眼 沙眼衣原體 衣原體單克隆抗體膠體金法 慢性結(jié)膜炎

　　0引言

　　沙眼是由沙眼衣原體引起的一種慢性傳染性結(jié)膜角膜炎，可致盲。因其在瞼結(jié)膜表面形成粗糙不平的外觀，形似沙粒，故名。可發(fā)生于任何人群，主要見(jiàn)于衛(wèi)生狀況差的地區(qū)[1]。全世界約有3～6億人口患沙眼。20世紀(jì)50年代以前，該病曾在我國(guó)廣泛流行。70年代后，發(fā)病率大大降低�，F(xiàn)在，重癥沙眼已很少見(jiàn)，臨床上常見(jiàn)的是一些處于一期或以前的不典型病例，單憑臨床表現(xiàn)，只能初步診斷為疑似沙眼。另外有些結(jié)膜炎患者的癥狀和輕型沙眼的癥狀十分相像，如不及時(shí)確診，勢(shì)必延誤治療。既往實(shí)驗(yàn)室采用雞胚細(xì)胞培養(yǎng)法分離衣原體，雖然特異性強(qiáng)，但成本昂貴，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且受多種因素影響，難以推廣應(yīng)用。70年代初建立的微量免疫熒光法，相對(duì)簡(jiǎn)便快速，但因應(yīng)用多價(jià)抗體，不易標(biāo)準(zhǔn)化。衣原體單克隆抗體的問(wèn)世，有效的克服了上述兩種方法的缺點(diǎn)，采用熒光、酶、膠體金等標(biāo)記衣原體單克隆抗體，用于實(shí)驗(yàn)診斷，具有快速、簡(jiǎn)便、特異性強(qiáng)、檢出率高等優(yōu)點(diǎn)。本文利用衣原體單克隆抗體膠體金法診斷和鑒別診斷30例眼病患者，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

　　1對(duì)象和方法

　　1.1對(duì)象 選取的30例患者均系西安市眼科醫(yī)院門(mén)診或住院病房。其中男16例，女14例，年齡 7～70歲。膠體金衣原體單克隆抗體診斷盒：購(gòu)自上海凱創(chuàng)生物技術(shù)有限公司。

　　1.2方法 用5g/L地卡因麻醉，使用試劑盒提供的配套拭子于結(jié)膜上穹隆部反復(fù)擦拭以保證取到大量細(xì)胞。將樣品處理管放在工作臺(tái)上，加入6滴溶液A，將采樣拭子放入含有溶液A的樣品處理管中，室溫放置，在處理過(guò)程中不斷旋轉(zhuǎn)并在管壁擠壓拭子，使液體不斷被擠出，重復(fù)多次，處理2min。然后加入6滴溶液B，旋轉(zhuǎn)并擠壓拭子，盡量使液體流出，處理2min。將樣品處理管中已處理的樣品滴加2～3滴至檢測(cè)試劑盒的加樣孔中，等待結(jié)果的出現(xiàn)，加樣10min時(shí)可判讀結(jié)果，為確保陰性結(jié)果，請(qǐng)勿在15min后判斷結(jié)果。最后按感染物品的處理方法將拭子丟棄.處理后的樣品如在60min內(nèi)使用，并不影響試劑盒的檢測(cè)結(jié)果。

　　陰性結(jié)果，僅質(zhì)控區(qū)(C)有一條紅線，檢測(cè)區(qū)(T)無(wú)紅線出現(xiàn)(圖1)。陽(yáng)性結(jié)果，除質(zhì)控區(qū)(C)外，另有一條紅線出現(xiàn)在檢測(cè)區(qū)(T)(圖1)。無(wú)效結(jié)果， 質(zhì)控區(qū)(C)不出現(xiàn)紅線,則結(jié)果無(wú)效。應(yīng)更換新的檢測(cè)試劑盒重復(fù)實(shí)驗(yàn)。可用剩余的已處理的樣品或重新取樣。

　　圖1 沙眼衣原體(略)

　　A：陰性;B：陽(yáng)性

　　2結(jié)果

　　臨床明確診斷沙眼的患者10例，其檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率為100%。10例其他原因引起的慢性結(jié)膜炎患者，其中1例查到沙眼衣原體。10例慢性病毒性結(jié)膜炎患者中1例查到沙眼衣原體。

　　3討論

　　衣原體是介于立克次氏體和病毒之間的一種原核微生物，呈球形，直徑約0.3～0.5μm，有細(xì)胞壁。能致沙眼的病原體就目前所知有多種血清型。我國(guó)目前沙眼發(fā)病率大為降低，但診斷卻愈來(lái)愈困難，主要原因是輕型沙眼的癥狀和其他類(lèi)型的結(jié)膜炎臨床難以區(qū)分，如不及時(shí)診治，將會(huì)出現(xiàn)倒睫、角膜血管翳、內(nèi)翻倒睫等引起角膜損害，影響視力甚至可致盲。膠體金檢測(cè)法簡(jiǎn)便快速，比直接免疫熒光法[2,3]更省時(shí)，僅0.5h就可出結(jié)果，結(jié)果判斷直觀，不需要熒光顯微鏡、酶聯(lián)檢測(cè)儀等設(shè)備。具有廣闊的推廣應(yīng)用前景。試劑盒采用的是抗衣原體屬特異性脂多糖LPS單克隆抗體，因此，不但可用于眼科，更重要的是可用于婦產(chǎn)科、泌尿科、性病科等沙眼衣原體感染性疾病的診斷。

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