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回答5
我們邀請(qǐng)臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師解答上述提問(wèn),您可以進(jìn)行追問(wèn)或是評(píng)價(jià)
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劉保福 主治醫(yī)師
威縣常屯衛(wèi)生院
一級(jí)甲等
婦產(chǎn)科
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巢式 PCR 是一種特殊的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù),具有高特異性和高靈敏度等特點(diǎn)。與普通 PCR 相比,在原理、操作流程、應(yīng)用范圍、優(yōu)缺點(diǎn)等方面存在差異。 1. 原理:巢式 PCR 采用兩對(duì)引物進(jìn)行兩輪擴(kuò)增,而普通 PCR 通常只用一對(duì)引物。 2. 操作流程:巢式 PCR 第一輪擴(kuò)增產(chǎn)物作為第二輪擴(kuò)增的模板,普通 PCR 則直接對(duì)原始模板進(jìn)行擴(kuò)增。 3. 應(yīng)用范圍:巢式 PCR 常用于檢測(cè)微量病原體、稀有突變等,普通 PCR 應(yīng)用于常規(guī)基因檢測(cè)。 4. 特異性:巢式 PCR 特異性更高,能有效減少非特異性擴(kuò)增。 5. 靈敏度:巢式 PCR 靈敏度優(yōu)于普通 PCR,可檢測(cè)更低濃度的目標(biāo) DNA。 6. 優(yōu)缺點(diǎn):巢式 PCR 優(yōu)點(diǎn)是準(zhǔn)確性高,缺點(diǎn)是操作較復(fù)雜;普通 PCR 優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,缺點(diǎn)是特異性和靈敏度可能稍低。 總之,巢式 PCR 和普通 PCR 各有特點(diǎn),在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)根據(jù)具體需求選擇合適的方法。
2025-02-17 22:12
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回答4
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孟慶福 醫(yī)師
家庭醫(yī)生在線合作醫(yī)院
其他
全科
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你好, 一般應(yīng)用于動(dòng)物方面。如:乙肝病毒病毒,梅毒螺旋體,HIV,腫瘤基因等 巢式PCR,可以在10的六次方基因組背景下檢測(cè)到一個(gè)拷貝的病毒基因,也不像二次PCR容易產(chǎn)生成片的產(chǎn)物,是效果最好的PCR,但也因此是最容易污染的PCR
2015-12-23 04:37
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回答3
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劉浩慶 醫(yī)師
肇慶市大旺開(kāi)發(fā)區(qū)醫(yī)院
一級(jí)
全科
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您好!你的問(wèn)題可以在醫(yī)院檢查到。它的意思是“巢式聚合酶鏈反應(yīng)”。希望對(duì)你有幫助!
2015-12-22 19:43
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回答2
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肖起濤 主治醫(yī)師
家庭醫(yī)生在線合作醫(yī)院
其他
內(nèi)科
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cr是檢測(cè)病毒和腫瘤的一種檢測(cè)方法。一般用于動(dòng)物的檢測(cè)。這是一種檢測(cè)病毒和腫瘤的一種方法,這種的檢測(cè)精確率比較高,但也是最容易發(fā)生感染的檢測(cè)。醫(yī)生詢問(wèn):請(qǐng)問(wèn)你是因?yàn)橛龅绞裁磫?wèn)題,來(lái)問(wèn)這個(gè)的呢?
2015-12-22 15:16
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回答1
我們邀請(qǐng)臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師解答上述提問(wèn),您可以進(jìn)行追問(wèn)或是評(píng)價(jià)
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史東岳
家庭醫(yī)生在線合作醫(yī)院
其他
全科
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你好,如果用普通PCR檢測(cè)不到條帶是因?yàn)閿U(kuò)增模板量太低造成的,為了提高檢測(cè)靈敏度和特異性,可以采用巢式PCR。其優(yōu)點(diǎn)是:1、克服了單次擴(kuò)增“平臺(tái)期效應(yīng)”的限制,使擴(kuò)增倍數(shù)提高,從而極大的提高了PCR的敏感性;2、由于模板和引物的改變,降低了非特異性反應(yīng)連續(xù)放大進(jìn)行的可能性,保證了反應(yīng)的特異性;3、內(nèi)側(cè)引物擴(kuò)增的模板是外側(cè)引物擴(kuò)增的產(chǎn)物,第二階段反應(yīng)能否進(jìn)行,也是對(duì)第一階段反應(yīng)正確性的鑒定,因引可以保證整個(gè)反應(yīng)的準(zhǔn)確性及可行性。但其亦有缺點(diǎn):進(jìn)行第二次PCR墳增引起交叉污染的幾率大。為了克服此缺點(diǎn),可彩用同一反應(yīng)管中巢式PCR,主要利用內(nèi)外引物Tm值不同。如果你已排除引物,酶,RNA提取,逆轉(zhuǎn)錄等等其他原因引起的PCR不成功,確定關(guān)鍵原因是模板量低的話,可以用巢式。但還是建議先排除一下其他可能因素,畢竟普通PCR簡(jiǎn)單。
2015-12-22 14:04
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